可的松检测试剂盒(酶联免疫法) ELISA操作孵育过程常见问题及解答: 1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*; 2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。 3)孵育温度未按照说明书要求进行,温度过高或过低; 解决办法: 1) 贴封片或加盖; 2) 按说明步骤严格控制操作时间和孵育温度。 通用名称:可的松检测试剂盒(酶联免疫法) 英文名称:Cortisol ELISA 产品货号:EIA1887 产品规格:96T 检测样本:血清和血浆 公司品牌:德国DRG 储存条件:2-8℃ 检测方法:ELISA方法 预期用途:可用于人血清和血浆中可的松的定量检测 参考价格:询价 供应商家:大宝游戏注册真人平台
可的松检测试剂盒预期用途 可的松检测试剂盒用于人血清、血浆中可的松含量的定量检测。
可的松前言简介 皮质醇(氢huà可的松,复合物F)是人体中一种主要的糖皮质激素,它是由肾上腺皮质的束状带产生的。90%的循环皮质醇会结合到皮质醇结合球蛋白(CBG,皮质激素传递蛋白)上,7%的循环皮质醇会结合到白蛋白上,仅1-3%的循环皮质醇是以游离状态存在。仅仅游离状态的皮质醇才具有活性。游离皮质醇释放到唾液中,并作为皮质醇的一小部分代谢产物从肾脏排出。血液中游离皮质醇的水平可以以负反馈的形式通过下丘脑分泌的CRH(促肾上腺皮质激素释放激素)和垂体分泌的ACTH(促肾上腺皮质激素)来调节皮质醇的分泌,但皮质醇的水平也会受各种因素的影响。人体内的皮质醇有一个生理波动,在早晨达到峰值,在夜间则降至低水平。血浆皮质醇的这种起伏波动在唾液中可表现为:在人醒后的90分钟内达峰值。糖皮质激素分泌不正常的疾病可通过皮质醇的检测表现出来,如:库欣综合征和阿森氏疾病。因为皮质醇水平存在着日变化,所以在做个体皮质醇筛查或动力学实验(如地塞米松抑制实验或ACTH刺激实验)时应多采集几个时段的样品。唾液样品的采集是一个简单的采样方法,不需要方法静脉穿刺取样。孕妇、甲状腺功能低下、肾病综合征、明显肥胖和接受了不同药物治疗(包括口服bì孕药)患者的CBG水平可能会不正常,所以建议检测其唾液皮质醇。 可的松检测试剂盒检测原理 可的松ELISA试剂盒是基于竞争法的酶联免疫吸附检测试剂盒。微孔板中包被有抗可的松特异性单克隆抗体,样品中的可的松与HRP绑定的可的松竞争。洗板后,加入底物液孵育,之后再加入终止液。所绑定的过氧化物酶的量与样品中的可的松浓度成反比。 可的松检测试剂盒组成成分 ●微孔板——12×8包被有抗可的松抗体 ●标准品(SD 0-6)——7×1ml ●浓度0、20、50、100、200、400、800ng/ml ●换算0, 55.2, 138, 276, 552, 1104, 2208 nmol/L ●换算系数——1 ng/mL = 2.76 nmol/l——含0.3%Proclin 作为防腐剂 ●酶联物——1×25ml——即用型 含HRP结合的可的松 ●底物液——1×14ml——即用型 含TMB ●终止液——1×14ml——即用型 含0.5M 硫酸 ●洗涤液——1×30ml——40倍浓缩
可的松检测试剂盒检测方法 ●洗液稀释 ●30ml+1170ml蒸馏水 混匀 ●室温下2周稳定 ●检测开始前将试剂盒所有组分稳定至室温 可的松检测试剂盒储存条件 可的松ELISA试剂盒保存在2-8℃下,效期内有效。
可的松检测试剂盒检测步骤 ●加入20ul标准品、质控品、样品到各自的孔 ●每孔加200ul酶联物,混匀 ●室温下孵育60分钟(不用盖板) ●倒出孔内液体,用洗液3×400ul洗涤 ●加入100ul底物液 ●室温下孵育15分钟 ●每孔加入100ul终止液 ●450nm下读取吸光值,不超过加入终止液后的10分钟
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