人磷酸化Tau蛋白检测试剂盒（ELISA）
人磷酸化Tau蛋白检测试剂盒产品详细 | 中文名称 | 人磷酸化Tau蛋白检测试剂盒（ELISA） | | 英文名称 | Human Phospho Tau(181P) Assay Kit ELISA | | 产品货号 | 27812 | | 产品规格 | 96T | | 检测样本 | 人脑脊液 | | 适应物种 | 人 | | 预期用途 | 可用于检测人脑脊液磷酸化Tau蛋白的定量检测 | | 产品品牌 | 日本IBL | | 供应商家 | 大宝游戏注册真人平台
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人磷酸化Tau蛋白 ELISA试剂盒预期用途
人磷酸化Tau蛋白 ELISA试剂盒可用于人脑脊液的磷酸化Tau蛋白定量检测，仅供科研用，不用于临床诊断。
人磷酸化Tau蛋白检测试剂盒检测原理
人磷酸化Tau蛋白检测试剂盒是固相夹心ELISA（酶联免疫吸附测定）。当将*抗体包被在平板上时，将样品和标准品加入到板孔中进行*次反应。 反应后，加入HRP-缀合的二抗进入板孔进行第二次反应。 冲洗掉未结合的二抗后，将四甲基联本胺（TMB）加入孔中并显色。
人磷酸化Tau蛋白检测试剂盒储存条件
人磷酸化Tau蛋白检测试剂盒可保存于2-8℃下保存，有效期见试剂盒外包装。
人磷酸化Tau蛋白检测试剂盒成分
| 96T x 1 | 预包被板 | | 0.4mL x 1 | 酶标记抗体： (30倍浓缩)HRP标记抗人Tau p181-RK27A6 小鼠IgG Fab’） | | 0.5mL x 2 | 标准品: 重组人Tau441 | | 30mL x 1 | EIA缓冲液 | | 12mL x 1 | 标记抗体稀释液 | | 15mL x 1 | 显色剂 | | 12mL x 1 | 终止液 | | 50mL x 1 | 浓缩洗涤液: |
人磷酸化Tau蛋白检测实验所需器材(但试剂盒没有提供)
■酶标仪
■微移液管及其枪头
■量筒及烧杯
■去离子水
■冰箱(4°C)
■坐标纸(log/log)
■吸水纸
■试管(用于标准品稀释)
■洗瓶 (用于洗板)
■孵育器（37±1℃）
■一次性试剂管(用于浓缩酶标记抗体和显色剂)
人磷酸化Tau蛋白检测试剂盒实验步骤
1.使用前，将所有试剂应平衡至室温，大约30min，充分混匀，确保试剂质量无改变，标准曲线和样品检测必须同时进行.
2.确定样本空白孔，并加入100ulEIA缓冲液。
3.确定样本孔和标准品孔，样本和标准品（管1-7）100ul分别加入相应的孔中
4.盖板，*次孵育，
5.洗板，按照前述“操作注意事项"中第8-9条进行。使用稀释好的洗涤液，后在吸水纸上*拍干。
6.将每孔中加入100ul 准备好的标记抗体
7.盖板，第二次孵育
8.洗板，按照前述“操作注意事项"中第8-9条进行。使用稀释好的洗涤液，后在吸水纸上*拍干。
9.取需要量的底物液到一次性检测管中，每孔加入100ulTMB溶液。为了避免污染，检测管中剩余的底物液不得再次放回原底物液瓶中。
10.黑暗中室温孵育30min，颜色变蓝。
11.每孔加入100ul 终止液终止反应，通过点击板的一面来混合板内溶液，此时颜色变为黄色。
12.读取OD值：将板底污物清除，并保证板孔内无气泡，以空白孔为对照进行标准品和样本的测量。测量在450nm处进行，参考波长600-650nm，测量应在终止液加入后30min内进行。
人磷酸化Tau蛋白检测试剂盒检测步骤表格如下
| 试剂 | 待检测样品 | 标准品 | 样品空白 | | 检测样品100ul | 稀释标准品（1-7管）100ul | EIA缓冲液 | | 盖板，2-8°C下温育过夜 | | 洗板4次（每孔加洗涤液不少于350ul，按操作注意事项中的8和9条进行 | | 酶标抗体 | 100ul | 100ul | 100ul | | 盖板，2-8°C下温育30min | | 洗板5次（每孔加洗涤液不少于350ul，按操作注意事项中的8和9条进行 | | 底物液 | 100ul | 100ul | 100ul | | 室温避光温育30min | | 终止液 | 100ul | 100ul | 100ul | | 加终止液后,30min内于450nm/600-650nm处读取OD值， |
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